（西安）為了探討抑癌基因PTEN對肝癌細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的調(diào)控作用。研究者構(gòu)建野生型PTEN基因和突變型PTEN基因的真核表達(dá)載體pEGFP-WT-PTEN和pEGFP-PTEN,G129R。采用脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染法，分別將上述載體轉(zhuǎn)染不表達(dá)PTEN蛋白的人肝細(xì)胞肝癌細(xì)胞系HHCC，經(jīng)G418篩選，獲得穩(wěn)定表達(dá)PTEN蛋白的細(xì)胞克隆。以流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞周期，以Western blot法分析穩(wěn)定表達(dá)PTEN蛋白的肝癌細(xì)胞內(nèi)源性的磷酸化AKT表達(dá)水平，同時與未進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)染空載體pEGFP-C1的HHCC細(xì)胞進(jìn)行對照。結(jié)果穩(wěn)定表達(dá)野生型PTEN蛋白的肝癌細(xì)胞，細(xì)胞生長受到明顯抑制，與轉(zhuǎn)染空載體的HHCC細(xì)胞比較，G1期細(xì)胞比例顯著增高，G2期和S期細(xì)胞比例顯著降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而轉(zhuǎn)染突變型PTEN基因的HHCC細(xì)胞，與轉(zhuǎn)染空載體的HHCC細(xì)胞比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與轉(zhuǎn)染空載體的HHCC細(xì)胞比較，穩(wěn)定表達(dá)野生型PTEN蛋白的HHCC細(xì)胞，其內(nèi)源性磷酸化AKT水平明顯減低；而轉(zhuǎn)染突變型PTEN基因的HHCC細(xì)胞，其AKT水平無明顯變化?？梢娨吧蚉TEN基因?qū)Ω伟┘?xì)胞周期具有調(diào)控作用，而突變型PTEN 基因喪失對肝癌細(xì)胞周期的調(diào)控作用；野生型PTEN基因可能通過降低AKT的活化而實(shí)現(xiàn)對肝癌細(xì)胞周期的調(diào)控。/**/