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乙酰肝素酶-siRNA表達載體的構建及其抑制黑素瘤細胞株體外 【?2008-05-26 發布?】 臨床報道
該項研究目的是構建針對人乙酰肝素酶(HPSE)基因的小干擾RNA(siRNA)及其表達載體,觀察其對A375細胞HPSE基因的干擾作用及其對腫瘤細胞體外侵襲的抑制作用。方法采用設計并構建了重組質粒pRNATU6.1/HPSE―siRNA,轉染A375細胞,用實時熒光定量PCR法和蛋白質印跡法分別測定HPSE基因RNA和蛋白水平的表達變化,Matrigel侵襲實驗觀察A375細胞體外侵襲能力的改變。結果將針對HPSE基因的siRNA的雙鏈寡核苷酸片段正確克隆到pRNATU6.1載體;轉染A375細胞,與對照組比較,HPSE―siRNA組HPSE基因和蛋白的表達均明顯降低。轉染后腫瘤細胞的體外侵襲能力與對照組相比受到明顯抑制。由此得出結論,成功構建了針對HPSE基因的siRNA載體,HPSE―siRNA轉染A375細胞可以顯著降低細胞HPSE基因和蛋白的表達。/**/
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